俄色叶安全性评价研究

药材收集
变叶海棠和花叶海棠均为2013年5月23日采自甘孜州炉霍县,由成都中医药大学鉴定为蔷薇科植物变叶海棠Malus toringoides(Rehd.)Hughes.和花 叶海棠Malus transitoria(Batal.)Schneid.的干燥叶。
实验药物
变叶海棠、花叶海棠提取物:以20倍水为提取溶剂,加热回流提取3次,每次时间1h,滤过,合并滤液,得水提物,用生理盐水溶解,配制成1g生药/ml备用。实验时再用生理盐水将 提取物分散,变叶海棠、花叶海棠分别设成3个剂量组,即:5g/kg·d、1 0g/kg·d、15g/kg·d。 生理盐水,科伦药业有限公司。
实验动物
KM小鼠,SPF级,18~22g,雌雄各半,合格证号为:SCXK(川)2008-19,由四川省中医药科学院实验动物中心提供。 动物购回后饲养3天,观察各鼠的一般外观、行为活动、饮水 进食情况、大小便性状,并进行称重,符合实验要求的动物供试验用。
实验方法
将小鼠随机分成空白对照组、变叶海棠(低、中、高剂量)组、花叶海棠(低、 中、高)组,共7个组。空白对照组给予生理盐水,其余 组按照“2.3.7.1.2”剂量分别给予相应药物,一次性灌胃给予实验动物,灌胃体积均为 0.2 ml/10g,连续观察14d,并称量小鼠给 药前、给药后第 3、7、14d 的体重。观察小鼠的一般症状(皮肤、毛发,行为活动,呼吸,心跳,眼泪、瞳孔和饮食等)和死亡情况,对死亡动物进行尸检并记录死亡原因,必要时做病理检查。
试验结果
变叶海棠:高剂量组在给药后1-2h给药动物部分出现自发活动减少、呼吸 急促、竖毛等毒性表现,持续时间为3-4h。剂量越低,动物出现毒性反应的比例越低。给药后第二天开始体重正常增长。
花叶海棠:高剂量组在给药后1-2h给药动物部分出现自发活动减少、呼吸急促、闭目等毒性表现,持续时间为3-4h。剂量越低,动物出现毒性反应的比例越低。给药后第二天开始体重正常增长。
二者均未见明显中毒症状,14天内动物无死亡,且对动物脏器进行解剖观察(心、肝、脾、肺、肾等),均未发现任何病变现象。根据2003年版《保健食品检验与评价技术规范实施手册》中LD50霍恩氏法得出LD50值,LD50>15g/kg·bw。 根据急性毒性分级标准,变叶海棠与花叶海棠均属无毒物质。
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